东盛生物(Dongsheng Biotech)
Guangzhou Dongsheng Biotech Co., Ltd.
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Taq Plus DNA聚合酶
PCR/RT-PCR >> PCR试剂
Taq Plus DNA聚合酶图片

品牌: 东盛
产地: 广州
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P1032250 U-
P10341,000 U-
品牌:东盛
产地:广州
产品介绍

产品组分

 P1031
 Taq Plus DNA聚合酶 2.5 U/μl 100 μl
 10×Tpol Buffer(Mg2+ Plus) 1.25 ml
 6×Loading Buffer 1 ml
 P1032
 Taq Plus DNA聚合酶 2.5 U/μl 100 μl
 10×Tpol Buffer(Mg2+ Plus) 1.25 ml
 dNTPs(各2.5 mM) 1 ml
 6×Loading Buffer 1 ml
 P1033
 TaqPlus DNA聚合酶 2.5 U/μl 400 μl
 10×Tpol Buffer(Mg2+ Plus) 1.25 ml×2
 6×Loading Buffer 1 ml
 P1034
 Taq Plus DNA聚合酶 2.5 U/μl 400 μl
 10×Tpol Buffer(Mg2+ Plus) 1.25 ml×2
 dNTPs(各2.5 mM) 1 ml
 6×Loading Buffer 1 ml

注:  10×PCR Buffer分为Mg2+ Plus与Mg2+ Free两种包装,可方便选择。如没特别说明提供10×PCR Buffer(Mg2+ Plus)。Mg2+ Free的10×PCR Buffer提供25 mM MgCl2
 
保存条件
    -20℃保存2年。多次冻融不影响生物学活性。
 
产品说明
    Taq Plus DNA聚合酶是Taq DNA聚合酶与Pfu DNA聚合酶的独特比例混合物。其保真性是Taq DNA聚合酶的4倍,扩增片段的长度可达20 kb(简单模板)。在扩增复杂模板(如GC-rich或重复序列)时,Taq Plus DNA聚合酶的扩增效率高于Taq DNA聚合酶,可用于复杂模板的PCR扩增。扩增产物具有两种末端:平末端与3'-dA。
 
产品特点
    复杂模板扩增:如含有GC-rich或重复序列的模板。
    保真性好:保真性是Taq DNA聚合酶的4倍。
    长片段扩增:扩增片段的长度可达20 kb。
 
产品用途
    复杂模板PCR扩增
 
活性定义
    一个活性单位(U)指用活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物,在72℃、30 min内,摄入10 nmol全核苷酸所需的酶量。
 
质量控制
    相关测试表明无外源内切酶或外切脱氧核糖核酸酶、核糖核酸酶污染;PCR方法检测无宿主残余DNA,能有效扩增人基因组中的单拷贝基因;室温放置一周,扩增活性无明显改变。
 
10×PCR Buffer
  500 mM KCl
  100 mM Tris-Cl
  15 mM MgCl2
  1% Triton-100
 
酶贮存液
  20 mM Tris-HCl
  1 mM DTT
  0.1 mM EDTA
  100 mM KCl
  0.5 %TW 20
  0.5 % NP 40
  50 % Glycerol
 
应用举例
注:以下反应举例为50 μl标准PCR体系,仅供参考。实际PCR条件应根据模板、引物结构、目的片段大小加以优化,确定最佳反应条件。
以λ DNA为模板,扩增1 kb片段。

 λ DNA(2.5 ng/μl) 1 μl
 引物1(10 μM) 2 μl
 引物2 (10 μM) 2 μl
 10×PCR Buffer 5 μl
 dNTPs(2.5 mM/L) 4 μl
 Taq Plus DNA聚合酶(2.5 U/μl) 0.5-1 μl
 超纯水 补足至50 μl

 
PCR反应条件

 95℃ 3 min
 95℃ 30 sec
 55~68℃ 30 sec  30 Cycles
 72℃ 1 min
 72℃ 5 min

 
注意事项
    1、Taq Plus DNA聚合酶的扩增产物有两种末端:平末端和3'-dA突出末端。要提高克隆效率,建议PCR产物纯化后,加A再进行TA克隆。
    2、建议在冰上配置PCR 反应液后,再放入PCR仪中进行扩增。这有利于提高扩增的特异性,减少非特异性扩增,得到良好的PCR结果。
    3、模板DNA推荐用量(50 μl PCR体系)

 人类基因组DNA 0.1 – 1 μg
 λDNA 0.5 – 5 ng
 质粒DNA 0.1 – 10 ng
 大肠杆菌DNA 10 – 100 ng

 
Q&A
问:Taq Plus DNA聚合酶可扩增多长片段?
答:对于简单模板,可扩增20 kb以下片段。如扩增长片段有困难,建议选择Long Taq Mix。
 
问:TaqPlus DNA聚合酶的扩增产物有几种末端?
答:有两种末端,平末端和3'-dA突出末端,以平末端产物为主。这是由于Taq Plus DNA聚合酶是Taq DNA聚合酶与Pfu DNA聚合酶的特定比例混合物。要提高TA
克隆效率,建议对PCR产物纯化后,加A再进行TA克隆

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